DGL樹枝狀大分子是一種以賴氨酸為單體,通過縮聚反應(yīng)形成的高度支化聚合物,屬于樹枝狀大分子家族的重要成員。其結(jié)構(gòu)由內(nèi)核向外逐層擴(kuò)展,形成具有明確代數(shù)(G1-G5)的樹狀球體,表面富含高密度活性氨基基團(tuán),內(nèi)部存在可調(diào)控的納米級(jí)空腔。這種獨(dú)特結(jié)構(gòu)賦予其精準(zhǔn)的分子設(shè)計(jì)能力,可通過修飾氨基實(shí)現(xiàn)功能化,例如連接羧基、磺酸基、PEO等基團(tuán),或靶向配體(如抗體、葉酸)以增強(qiáng)生物相容性。
DGL的樹枝狀結(jié)構(gòu)由內(nèi)核、支化單元和外圍基團(tuán)組成,代數(shù)越高,分子尺寸和表面氨基密度越大。其表面氨基帶正電荷,可與帶負(fù)電的物質(zhì)(如DNA、RNA、蛋白質(zhì))通過靜電作用結(jié)合,形成穩(wěn)定的復(fù)合物。內(nèi)部納米級(jí)空腔可包載藥物分子,實(shí)現(xiàn)物理包封或化學(xué)鍵合。此外,DGL的降解產(chǎn)物為人體必需氨基酸(賴氨酸),生物毒性低,可控性高。
一、儲(chǔ)存條件
儲(chǔ)存形式:
凍干粉:通常為白色或類白色粉末,應(yīng)密封保存于-20°C避光干燥環(huán)境,防止吸潮和降解。
溶液:若為液體形式,需根據(jù)說明書要求儲(chǔ)存(通常為4°C短期保存,-20°C長(zhǎng)期保存),避免反復(fù)凍融。
防潮避光:
樹枝狀大分子易吸濕,取用后應(yīng)立即密封,置于干燥器中。
部分熒光標(biāo)記或光敏型衍生物需避光保存。
有效期:
注意生產(chǎn)日期和保質(zhì)期,過期產(chǎn)品可能導(dǎo)致性能下降或毒性增加。
二、溶解與配制
溶劑選擇:
常用溶劑:去離子水、PBS緩沖液、生理鹽水等。
避免使用含高濃度鹽或有機(jī)溶劑的溶液,除非已驗(yàn)證其相容性。
溶解方法:
輕柔渦旋或輕微振蕩助溶,避免劇烈超聲或高速攪拌,以防結(jié)構(gòu)破壞。
可輕微加熱(如37°C)促進(jìn)溶解,但溫度不宜過高。
濃度控制:
嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)或說明書推薦濃度使用。過高濃度可能導(dǎo)致細(xì)胞毒性或非特異性聚集。
三、生物實(shí)驗(yàn)使用注意事項(xiàng)
細(xì)胞毒性:
陽離子樹枝狀大分子(尤其是高代數(shù)G4以上)可能因表面正電荷與細(xì)胞膜相互作用而產(chǎn)生細(xì)胞毒性。
建議進(jìn)行細(xì)胞毒性預(yù)實(shí)驗(yàn)(如CCK-8、MTT),確定安全使用濃度范圍。
血清干擾:
血清蛋白可能與樹枝狀大分子結(jié)合,影響其與細(xì)胞的相互作用。需根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康臎Q定是否在含血清培養(yǎng)基中使用。
pH敏感性:
賴氨酸基樹枝狀大分子的電荷狀態(tài)受pH影響,可能影響其與核酸(如DNA、siRNA)的復(fù)合能力(用于基因轉(zhuǎn)染時(shí))。
內(nèi)毒素控制:
若用于細(xì)胞或動(dòng)物實(shí)驗(yàn),必須確保產(chǎn)品低內(nèi)毒素(<1 EU/mg),避免引發(fā)非特異性免疫反應(yīng)。
四、操作安全
個(gè)人防護(hù):
操作時(shí)佩戴手套、口罩和實(shí)驗(yàn)服,避免吸入粉末或接觸皮膚/眼睛。
廢棄物處理:
含樹枝狀大分子的廢液應(yīng)按照實(shí)驗(yàn)室化學(xué)/生物廢棄物處理規(guī)程進(jìn)行收集和處置,不可直接倒入下水道。
五、其他注意事項(xiàng)
批次差異:
不同批次產(chǎn)品可能存在結(jié)構(gòu)均一性、分子量分布差異,建議在關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)中使用同一批次。
功能化修飾:
若使用表面修飾(如PEG化、靶向配體連接)的DGL,需注意修飾基團(tuán)的穩(wěn)定性與活性。
儀器兼容性:
高濃度溶液可能堵塞HPLC或微流控芯片,使用前需過濾(如0.22μm濾膜)。